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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時間：2018-03-15 作者：佚名 來源：網(wǎng)絡(luò)整理
依據(jù)法醫(yī)學血清學抗體沉淀反應(yīng)的理論，使用抗鹿Hb（血紅蛋白）血清為抗體，快速準確地鑒別了鹿血干粉，為這種名貴中藥的原料質(zhì)量控制提供了一種新型準確穩(wěn)定的方法。
1、實驗與方法
1.1抗鹿Hb血清的制備
抗原：無菌操作下來鹿血液若干毫升，裝人加有適量抗凝劑的容器中，冰箱保存。取出以生理鹽水離心洗去血漿成分，取出若干毫升，加入滅菌冷蒸餾水洗制成20－40％的鹿血Hb溶液，除去基質(zhì)后，加等量高滲鹽水，再加入等量不完全福氏佐劑乳化供免疫注射使用。免疫注射：用健康家兔為試驗對象。
以家兔大腿胭窩印肌肉背部皮下為注射本。間隔6日每次4－7ml，各注射一次，歷時18天，心臟穿刺取血初試滿意后，以免頸A吊線放血法全采血分離血清。效價及特異性測定：以事先準備好的鹿血HbV1/1000，1/2000，1/5000，1/10000，1/30Q0分別測定l－5號抗鹿Hb血清的效效價，結(jié)果各號抗鹿Hb血清效價均高于1/1000，、最高5號達到1/30000倍，并以其它豬、牛、羊動物血色素l/1000作沉淀試劑，結(jié)果均呈陰性反應(yīng)，說明抗鹿Hb血清特異性良好。
1.2應(yīng)用抗鹿Hb血清定性鑒別鹿血干粉鹿血干粉來源于遼寧遠東藥業(yè)集團，樣品標號l~5＃，五個樣品外觀均為暗紫色干血粉。血樣提取及處理：取1~5＃血樣各0.1g，分別裝入試管中，加人適量生理鹽水，充分攪拌，經(jīng)數(shù)小時浸泡后，離心取血清液，測其濃度、以千倍稀釋液作如下試驗。沉淀試驗：把1~5＃血樣1/1000稀釋液分別用毛細管壁緩緩注入預(yù)先裝有半量抗鹿Hb血清的微型沉淀管內(nèi)，室溫下日光觀察，沉淀反應(yīng)結(jié)果表明；血樣1，2，3，4，5＃微型沉淀管內(nèi)二液交界面上，15分鐘后出現(xiàn)白色沉淀環(huán)，此為抗鹿陽性反應(yīng)。血樣3＃，經(jīng)60分鐘呈抗陰性反應(yīng)，后經(jīng)抗豬Hb血清測定，鑒定為豬血。即1，2，4，5＃血樣為鹿血。
2、結(jié)果與討論
本文應(yīng)用不完全佐劑加抗原做家兔胭部肌肉及背部皮下注射六日間隔三次，僅十八天便制成了高效價特異性良好的抗鹿Hb血清，該免疫方法快速準確。應(yīng)用抗腐血清Hb可方便準確地鑒定鹿血干粉的真?zhèn)危瑸檫@種名貴中藥材的鑒別及藥材收購的質(zhì)量控制提供了一個良好的鑒定方法，與此同時，也可為其他動物制品的種屬鑒別提供一個可靠的經(jīng)驗。
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