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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間：2018-03-15 作者：佚名 來源：網(wǎng)絡(luò)整理
1發(fā)病情況及臨床癥狀
該養(yǎng)鴿戶飼養(yǎng)1．5歲的種鴿620只，10月18日給種鴿肌肉注射雞I系苗1頭份／只，30-40日齡肉鴿200只，但未免疫疫苗。鴿群發(fā)病2天，種禽死亡2只，死亡率為0．32％，肉鴿死亡78只，死亡率為39％，使用恩諾沙星進(jìn)行治療，但效果不明顯。病鴿精神不振，食欲減退，飲水量增加，羽毛松亂無光澤，垂頭縮頸，翅膀松散下垂，口鼻分泌物增多。部分鴿子還出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，如頭頸扭曲，頭向后仰。糞便先由黑色粒狀，后轉(zhuǎn)為黃綠色稀便。
2剖檢病變
喉頭、氣管分泌物增多，嗦囊內(nèi)充滿酸臭液體及氣體，腺胃乳頭有出血點(diǎn)，心包周圍、肝表面覆蓋一層黃色膠胨樣物。十二指腸、小腸出血，腸系膜脫落、潰瘍，盲腸扁桃體腫大出血。種鴿卵巢出血。
3實(shí)驗(yàn)室診斷
3．1樣品處理
取脾和肺進(jìn)行研磨，加人生理鹽水制成20％的乳劑，反復(fù)凍融3次，于零下20度保存以備用。
3．2 RT-PCIZ
RT-PCR結(jié)果見圖1。
RNA提取與反轉(zhuǎn)錄(RT)。取制備好的病料懸液，按RNA提取試劑盒說明書進(jìn)行提取，得到的RNA模板立即用于反轉(zhuǎn)錄。反轉(zhuǎn)錄體系為25微升，RNA模板16微升，引物M1 2微升，5xBuffer5微升，dNTP 2微升，RNasin0．5微升，M-MLV0．5微升。置PCR儀中42℃反轉(zhuǎn)錄1小時(shí)，95℃5分鐘，反應(yīng)結(jié)束后直接使用或于零下70度保存。
PCR擴(kuò)增。取反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物5．0微升加入到新城疫PCB反應(yīng)A混合物的PCB管中，混勻，2000轉(zhuǎn)／分鐘離心10秒，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增；同時(shí)設(shè)陰陽性對照。擴(kuò)增條件為94度4分鐘，94度30秒，56度50秒，72度50秒,35個(gè)循環(huán)，72度延伸5分鐘，4度保存。取反應(yīng)A的反應(yīng)物0．5微升加入到新城疫PCB反應(yīng)B混合物的PCR管中，混勻，2000轉(zhuǎn)／分鐘離心10秒，立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增；同時(shí)設(shè)陰陽性對照，擴(kuò)增條件為94度4分鐘，94度30秒，56度50秒，72度50秒，35個(gè)循環(huán)，72度延伸5分鐘，4度保存。
瓊脂糖凝膠電泳。取PCR產(chǎn)物5微升，于1％瓊脂糖凝膠中電泳，凝膠牛含有13．5微升／毫升溴化乙錠，電泳緩沖液為0．5xTAE，80伏30分鐘，電泳完后于紫外燈下觀察拍照，有460bp的目的帶出現(xiàn)。
3．3病毒分離鑒定
將3．1處理的樣品，加入“雙抗”(青霉素、鏈霉素)(2000單位／毫升)，感作l小時(shí)，然后離心取上清液接種10日齡的SPF雞胚2枚，37度孵育，接種后雞胚分別在36小時(shí)和40小時(shí)死亡，收集尿囊液，做紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)(HA)，紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集，HA效價(jià)為28和27。
用新城疫陽性血清做血凝抑制試驗(yàn)(HI)，可抑制新城疫病毒對紅細(xì)胞的凝集，抑制價(jià)是27。
由此證明此鴿群發(fā)生的為新城疫病。
4防治
鴿群緊急免疫新城疫Ⅵ系苗，種鴿4羽份／只，肉鴿3羽份／只進(jìn)行滴鼻。
每天的飲水中加入0．05％的氟苯尼考和3％的葡萄糖供鴿子飲用，連用3天，增強(qiáng)鴿子的抵抗力，防止繼發(fā)感染。
保持飼料和飲水的清潔衛(wèi)生，保證鴿舍的通風(fēng)干燥，加強(qiáng)鴿舍的保暖措施，徹底清除鴿舍內(nèi)的糞便及污物，用消毒劑進(jìn)行消毒。
3天后回訪，除肉鴿緊急免疫后死亡8只外，其余的肉鴿、種鴿病情已得到控制，并恢復(fù)正常。
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