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84農業(yè)網 時間：2018-03-15 作者：佚名 來源：網絡整理
球蟲病是家兔常見的寄生性原蟲病，主要由艾美爾屬球蟲所引起的，各種年齡的家兔都有易感性，4～5月齡幼兔感染率可達100%，球蟲病導致幼兔生長發(fā)育受阻，甚至大批死亡，本病常呈地方性流行。由于球蟲的種類和寄生部位的不同，可以分為肝球蟲病和腸球蟲��；但混合感染最為常見。據(jù)我國學者報道，全國已發(fā)現(xiàn)16種兔艾美爾球蟲。從1997～2005年中，我們在臨床上數(shù)百次改進飽和鹽水浮集法，盡量縮短診斷時間、提高檢出率，在256例球蟲病檢測中，診斷準確率達90%以上，為養(yǎng)兔業(yè)提供了很好的技術方法。
1材料和方法
1.1制備飽和食鹽溶液
將蒸餾水邊加熱邊加入NaCI，直至不再溶解生成沉淀為止（1000mL水中約加入NaCl370g）。用濾紙（型號為中速202）過濾，冷卻（NaCI略有析出）后使用。
1.2取糞便
將剖檢的病兔尸體平放，提出胃、腸部分平放在方盤內，取十二直腸或盲腸內的糞便（糞便內最好略帶血且不要過�。�5g放入容量為50～60mL的寬口瓶或量筒中備用。
1.3卵囊富集方法
1.3.1在盛有糞便的寬口瓶或量筒中加入少量的飽和食鹽溶液（一般為容器容量的1/2為宜），用玻璃棒壓碎且攪拌混勻，攪拌時注意不要濺出。攪拌好后將寬口瓶或量筒靜置40min左右。
1.3.2用四層紗布將靜置好的液體過濾入另一寬口瓶或量筒中，棄去糞渣，繼續(xù)注入飽和食鹽溶液至瓶口，要使瓶口液面凸起，但又不會溢出，靜置1.5小時左右。
1.3.3用層紗布將靜置好的液體過濾圖另一寬瓶口上，使載玻片底面與瓶內的液面相接觸，勿使有空隙；然后將載玻片輕而快地自瓶口向上提起，同時迅速翻轉，使液面向上，勿使液體流落：取一蓋玻片，均勻地壓在載玻片上，使蓋玻片與液體充分接觸，不要出現(xiàn)氣泡。
2鏡檢
將載玻片置于10X10倍的光鏡下，調整顯微鏡，使視野清晰，并且光亮不必太強。調好視野后，可隨意滑動載玻片的位置，仔細觀察是否有球蟲卵囊。顯微鏡下觀察球蟲卵囊呈橄欖形，有棗核般大小，卵囊壁有的厚有的薄，一般光滑而均勻一致。由于球蟲種類不同，所以卵囊的形態(tài)（包括長卵圓形、長圓形、卵圓形、梨形、長橢圓形、寬卵圓形、筒形）和顏色（淡黃、無色、橙黃、淡綠、淡灰）略有差異。
3討論和小結
3.1本診斷方法與普通的飽和鹽水漂浮法原理一致，都是采用比卵囊密度大的溶液浸泡糞便，使卵囊上浮于液體表層。但是本診斷方法更為簡單。對于實驗條件、實驗設備以及實驗操作的要求也不高，并且只要實驗操作無誤，發(fā)現(xiàn)卵囊的機會很高。非常適合基層獸醫(yī)人員診斷兔球蟲病。
3.2在配制飽和食鹽溶液時，要注意食鹽量不要加的過多，只要按照比例加入，不再析出即可。如果鹽量過多，在第二次靜置時就會析出大量食鹽結晶，影響觸片效果。
3.3在用載玻片接觸液面時，用力不要過大，并且要一次成功，因為靜置后所有的球蟲卵囊都會漂浮在液面上，經過一次接觸，球蟲卵囊大部分已經粘附在載玻片上，液面已所剩無幾。
3.4在向載玻片上壓蓋玻片時，用力要輕，要從載玻片的一側傾斜著壓向另一側，此時動作要迅速，一定要使蓋玻片和載玻片間沒有氣泡。如果出現(xiàn)氣泡，若觀察不仔細有時會誤將氣泡視作球蟲卵囊，影響鏡檢結果。
3.5在使用光鏡觀察時，光亮的強度一定要小，要使鏡下形成一個暗視野。因為球蟲卵囊并不是一個實心的橢圓體，而是空泡狀顏色略暗的橢圓體，若光亮太強，有時反而觀察不到球蟲卵囊。
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